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1. 預期用途

用于基于核酸的檢測的 HPV DNA 基因型 HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58 的第一國際標準集合由 5 個單獨的冷凍干燥重組質(zhì)粒制備物組成，該重組質(zhì)粒含有規(guī)定基因型的全長 HPV DNA。

克隆詳細信息可在每個國際標準的特定使用說明中找到（NIBSC 代碼分別為 14/258、14/260、14/104、14/262、14/264）。每個標準都在純化的人類基因組 DNA 的背景下配制，凍干成 0.5 ml 等分試樣并儲存在 -20 °C。這些材料在一項涉及 15 個實驗室的國際合作研究中進行了表征（WHO/BS/2019.2360）。

2. 注意

該制劑不適用于人類食物鏈中的人類或動物。

該材料含有來自人類胎盤的 DNA (Sigma, D7011)。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應被視為對健康有潛在危害。應根據(jù)您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應包括戴防護手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應小心謹慎，以免割傷。

NIBSC 19/226 人乳頭瘤病毒(WHO國際標準品)

3. 單元

第一國際標準的規(guī)定單位：

HPV31 DNA (14/258) 為每安瓿 1.6 x 10^7 國際單位 (IU)；

HPV33 DNA (14/260) 為每安瓿 1.6 x 10^7 IU；

HPV45 DNA (14/104) 為每安瓿 1 x 10^7 IU；

HPV52 DNA (14/262) 為每安瓿 7.9 x 10^6 IU；

HPV58 DNA (14/264) 為每安瓿 7.9 x 10^6 IU。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

每個安瓿含有凍干的 0.5 mL HPV 質(zhì)粒 DNA，稀釋在 10 mM Tris 緩沖液 pH7.4 中，含有 1 mM EDTA、5 mg/mL 海藻糖和源自胎盤的人 DNA (~1 x 10^6 GEq/mL)。

5. 存儲

安瓿瓶在收到時應儲存在 -20 °C 或以下。

請注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會在環(huán)境溫度下運輸這些材料。

6. 開瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個“易開”顏色的壓力點，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機可商購獲得。要打開安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標記）端的材料，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說明進行操作。

NIBSC 19/226 人乳頭瘤病毒(WHO國際標準品)

7. 材料的使用

在重組之前，不應嘗試稱量凍干材料的任何部分。HPV DNA 的第一個國際標準都包含高拷貝數(shù)模板。打開玻璃安瓿時，通過霧化污染 HPV 質(zhì)粒 DNA 的風險很高。材料必須在單獨的實驗室環(huán)境中打開和處理，遠離其他預擴增組件，如試劑、實驗室器具和樣品。

該材料以凍干形式提供，使用前應在 0.5 ml 無菌無核酸酶水中復溶。確保安瓿的內(nèi)表面被添加的水潤濕，以便重組粘附在玻璃上的任何凍干材料顆粒。當按照指示重組時，

14/258 (HPV31) 的終濃度為 3.2 x 10^7 IU/mL；

14/260 (HPV33) 的終濃度為 3.2 x 10^7 IU/mL；

14/104 (HPV45) 的終濃度為 2 x 10^7 IU/mL；

14/262 (HPV52) 的終濃度為 1.6 x 10^7 IU/mL；

14/264 (HPV58) 的終濃度為 1.6 x 10^7 IU/mL。

重組材料適用于校準內(nèi)部或工作標準，用于擴增和檢測 HPV DNA（WHO/BS/2019.2360）。該材料不得用于校準或評估提取、沉淀或離心程序。 NIBSC 可以為在提取步驟無法與擴增步驟分離的分析中使用 HPV DNA 基因型國際標準（例如進樣、應答平臺）提供指導。該材料尚未針對人類 DNA 核酸擴增技術(shù)進行校準。